噬菌体计数
噬菌体的效价是指1ml培养液中含侵染性的噬菌体粒子数。一般一个噬菌体形成一个噬菌斑,故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑形成单位(plaque-forming unit ,PFU),计算出噬菌体的效价。
噬菌斑(Plaque):将少量噬菌体与大量宿主细胞混合后,将此混合液与45℃左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀,铺平后培养。当一个噬菌体侵染一个敏感细胞后,不久即释放出一群子代噬菌体,它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞,并又引起它们裂解,如此经过多次重复经数小时至10余小时后,在平板表面布满宿主细胞的菌苔上,肉眼就可看到的一个个透亮不长菌的小圆斑,这就是噬菌斑。
由此可见,噬菌斑的形成与细菌菌落的形成有点相似,所不同的只是噬菌斑甚像一个“负菌落”。迅数全自动菌落分析仪可应用于噬菌斑平板计数的自动化。 |